أسباب عدم استقرار الببتيدات

رد فعل إزالة الرطوبة:في تفاعل إزالة الأسيل، يتم تحلل بقايا Asn/Gln لتكوين Asp/Glu.
إجراء تفاعل إزالة الرطوبة غير الإنزيمي-. يوجد Asn-Gly- تكون مجموعات الأميد الموجودة في البنية أسهل في التحلل المائي، كما أن مجموعات الأميد الموجودة على سطح الجزيء تكون أيضًا أسهل في التحلل المائي من مجموعات الأميد داخل الجزيء.
 

هناك سببان رئيسيان وراء أكسدة محاليل البولي ببتيد المؤكسدة بسهولة.
أولا، هناك تلوث بيروكسيد في الحل.
والثاني هو الأكسدة التلقائية للبولي ببتيدات.
من بين جميع بقايا الأحماض الأمينية، Met، Cys وHis، Trp، Tyr Etc. هي الأكثر عرضة للأكسدة. يؤثر الضغط الجزئي للأكسجين ودرجة الحرارة والمحلول العازل أيضًا على الأكسدة.

التحلل المائي:يتم كسر الروابط الببتيدية في البوليببتيدات بسهولة عن طريق التحلل المائي. تعتمد على Asp، يتم كسر الروابط الببتيدية المشاركة في التكوين بسهولة أكبر من الروابط الببتيدية الأخرى، وخاصة روابط Asp-Pro وAsp-Gly Peptide.

تكوين روابط ثاني كبريتيد غير صحيحة:التبادل بين روابط ثاني كبريتيد أو بين روابط ثاني كبريتيد ومجموعات سلفهيدريل يمكن أن يشكل روابط ثاني كبريتيد غير صحيحة، مما يؤدي إلى تغييرات في البنية الثلاثية وفقدان النشاط.

تسابق: إزالة Gly باستثناء أن جميع بقايا الأحماض الأمينية ذرات الكربون كلها مراوانية وعرضة لتفاعلات السباق تحت التحفيز الأساسي. في Asp تكون البقايا أكثر عرضة لتفاعلات السباق.

-إزالة:-يشير الإزالة إلى بقايا الأحماض الأمينية في إزالة المجموعات الموجودة على ذرات الكربون. Cys, Ser, Thr, Phe, Tyr يمكن لجميع البقايا المرور عبر - القضاء على التدهور.
في درجة الحموضة القلوية المعرضة لحدوث -الإزالة، ودرجة الحرارة والأيونات المعدنية لها أيضًا تأثير عليها.

يرتبط تمسخ الطبيعة أو الامتزاز أو التجميع أو تمسخ الترسيب عمومًا بتدمير البنية الثلاثية والبنية الثانوية. في حالة التشويه والتحريف، غالبًا ما تكون الببتيدات أكثر عرضة للتفاعلات الكيميائية ويصعب استعادة نشاطها. أثناء عملية تمسخ الببتيدات، يتم تشكيل الوسطيات أولاً. عادةً ما تكون قابلية ذوبان المواد الوسيطة منخفضة ومن السهل تجميعها وتشكيل الركام، والذي بدوره يشكل هطولًا مرئيًا.
 

1) الموقع-الطفرات الموجهة: يمكن تحسين استقرار البولي ببتيد عن طريق وسائل الهندسة الوراثية لاستبدال المخلفات التي تسبب عدم استقرار البولي ببتيد أو إدخال المخلفات التي يمكن أن تزيد من استقرار البولي ببتيد.

2) التعديل الكيميائي:هناك العديد من طرق التعديل الكيميائي للبولي ببتيدات، وأكثرها دراسة هي PEG Grooming. PEG هو مركب بوليمر -قابل للذوبان في الماء وقابل للتحلل في الجسم وغير -سام. PEG بعد دمجه مع البولي ببتيد، يمكنه تحسين قابلية ذوبان البولي ببتيد، وضبط التوافق الحيوي، وتحسين الاستقرار الحراري، ومقاومة التحلل بواسطة البروتياز، وتقليل مولد الضد، وإطالة عمر النصف- في الجسم. إن اختيار طريقة التعديل المناسبة والتحكم في درجة التعديل يمكن أن يحسن أو يحسن النشاط البيولوجي للمنتج الأصلي.

3) المضافة:يمكن تحسين استقرار الببتيدات عن طريق إضافة مواد مضافة مثل السكريات والبوليولات والجيلاتين والأحماض الأمينية وبعض الأملاح. تزيد السكريات والبوليولات من ثبات الببتيد عن طريق دفع المزيد من جزيئات الماء حول البروتين بتركيزات منخفضة. أثناء عملية التجفيف بالتجميد-، يمكن أيضًا للمواد-المذكورة أعلاه استبدال الماء وتكوين روابط هيدروجينية مع البولي ببتيد لتثبيت الشكل الطبيعي للبولي ببتيد، ويمكن أيضًا أن تزيد درجة حرارة التزجج للمنتج المجفف بالتجميد-. بالإضافة إلى ذلك، يمكن للمواد الخافضة للتوتر السطحي مثل SDS وTween وPluronic أن تمنع الامتزاز السطحي وتجميع وترسيب البوليبيبتيدات.

4) تجميد -مجفف:تتطلب سلسلة من التفاعلات الكيميائية التي تحدث في عديد الببتيدات مثل إزالة الأمادة، -الإزالة، والتحلل المائي، وما إلى ذلك، مشاركة الماء، ويمكن أيضًا استخدام الماء كطور متحرك للمواد المتفاعلة الأخرى. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يؤدي تقليل محتوى الماء إلى زيادة درجة حرارة تمسخ البوليببتيد. لذلك، التجفيد يحسن استقرار الببتيدات