يعتمد اكتشاف الببتيد العصبي Y (NPY) بشكل أساسي على الطرق المناعية، بما في ذلك مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) للتحليل الكمي والكيمياء المناعية (IHC) لتوطين الأنسجة.
ELISA هي طريقة شائعة الاستخدام للتحديد الكمي لمستويات NPY في العينات البيولوجية مثل المصل البشري، والبلازما، ومتجانسات الأنسجة، وlysates الخلية، والمواد الطافية لثقافة الخلية. يستخدم عادةً مبدأ التثبيط التنافسي: يتم طلاء الأجسام المضادة أحادية النسيلة NPY على صفيحة ميكروية، ويتم إضافة كل من المستضد المسمى بالبيوتين - والعينة التي تحتوي على المستضد المستهدف. يتنافس المستضد المستهدف مع المستضد المسمى للارتباط بالأجسام المضادة. بعد خطوة الغسيل، تتم إضافة HRP-المسمى avidin والركيزة TMB لتطوير الألوان؛ تتناسب شدة اللون عكسيا مع تركيز NPY في العينة. توفر هذه الطريقة حساسية وخصوصية عالية، مع نطاق كشف نموذجي يتراوح من 24.69 بيكوغرام/مل إلى 2000 بيكوغرام/مل وحد أدنى للكشف أقل من 9.59 بيكوغرام/مل.
يتم استخدام IHC لتوطين التعبير وتوزيع NPY داخل أقسام الأنسجة. من خلال استخدام أجسام مضادة محددة للارتباط بـ NPY في الأنسجة واستخدام تفاعل مولد اللون للتصور، تتيح هذه الطريقة إجراء تحليل نوعي أو شبه -كمي لتعبير NPY عبر الأنسجة المختلفة.
